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多功能氧化还原电位在线分析仪发光基因(lux gene)系统中包括结构基因luxC,D,A,B,E 和调节基因luxI和luxR 等。从不同发光细菌中分离得到的发光基因其种类和数量有所差异,例如luxF仅发现于明亮发光杆菌,但以上五个结构基因luxC,D,A,B,E 是普遍存在于已知的所有发光细菌中的。氧化还原电位在线分析仪厂家编码菌荧光素酶的基因是luxA 和luxB,在lux操纵子中,luxA 和luxB 是紧密相连的。以哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)为例,其luxA 基因中含有1065bp,编码的α亚基是355个氨基酸的多肽,分子量为40kD;luxB基因中含有972bp,编码的β亚基是有324个氨基酸的多肽,分子量为36kD。由α、β两亚基组成的荧光酶的分子量为76 kD。编码脂肪酸还原酶(多肽转移酶和还原酶)的luxC和luxD位于luxA、luxB基因的上游一侧,编码合成酶的luxE基因位于luxA,luxB基因的下游一侧。氧化还原电位在线分析仪luxC 含有1431bp,编码的蛋白质含有477个氨基酸,分子量为55 kD;luxD 编码的蛋白质分子量为33 kD;luxE编码的蛋白质分子量为42 kD。在明亮发光杆菌中还发现有luxF基因,它通常位于luxB和luxE之间,其编码的蛋白质分子量为26 kD 左右,但lux F基因在弧菌属和异短杆菌属中的发光基因系统中尚未被发现。在以上所有菌株的操纵子中,这些基因的顺序都相同,均为lux CDAB(F)E。
多功能氧化还原电位在线分析仪新方案用7个大肠杆菌菌落替换了熔断器,每个菌落被赋予不同的荧光蛋白基因。只有当这些基因被打开,允许细菌制造蛋白质时,它们才会发出荧光。颜色——黄色、绿色和红色——因表达的基因不同而不同。所有这些差别用肉眼都能清楚地辨别出来。在他们手中有了一个彩色的菌落后,氧化还原电位在线分析仪研究人员用一对不同颜色的细菌创建了一个代码。这七种颜色给了它们49种组合,它们编码了26个不同的字母和23个字母数字符号,如“@”和“$”。他们用成对的彩色细菌写成行的信息。为了“打印”这些信息,氧化还原电位在线分析仪研究人员将细菌转移到细菌生长的培养基琼脂平板上,然后压一张硝化纤维“纸”,这张纸是用来固定细菌的。此时,硝化纤维纸中的细菌仍然是看不见的。但是,通过将硝化纤维纸压入含有化学触发器的琼脂培养皿中,激活荧光蛋白的表达,信息的接受者可以打开关键基因并点亮颜色。(被选择点亮的蛋白质通常不会被细菌利用,所以它们通常会保持沉默,直到被研究人员激活。)只要接收者知道什么颜色对应什么字符,信息就知道了。但沃尔特和他的同事们又增加了一层防护。他们将基因插入对某些抗生素有抗药性的细菌中;这个想法是,只有耐抗生素的细菌携带真正的信息。如果这些信息落到错误的人手里,一旦基因被激活,接受者就会看到一堆颜色,无法阅读。但是如果接受者加入了正确的抗生素,不耐药的细菌和它们的颜色就会消失,使真正的信息变得清晰。第一个例子是“这是来自沃尔特·拉布@塔夫斯大学2010年的生物编码信息”,发表在9月26日的《美国国家科学院院刊》上。“这是一个很酷的想法,”伊利诺伊大学香槟分校的化学家Kenneth Suslick说。事实上,它与康奈尔大学物理学家保罗·麦克尤恩的科幻惊悚小说《螺旋》非常相似。书中,一位年长的真菌生物学家利亚姆·康纳(Liam Connor)通过将一种荧光蛋白的基因插入不同真菌的DNA,解决了一个存在了几十年的谜团。尽管身为科幻小说迷的沃尔特说,他想马上读这本书,但他说他以前从未听说过这本书。现在,在他的生物发光细菌的帮助下,他也可以写一些关于自己的传说。
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